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化學發光試劑相當緩慢,但當有某些催化劑存在時反應非常迅速。zui常用催化劑是金屬離子,在很大濃度范圍內,金屬離子濃度與發光強度成正比,從而可進行某些金屬離子的化學發光分析,利用這一反應可以分析那些含有金屬離子的有機化合物,達到很高的靈敏度。其次是利用有機化合物對魯米諾化學發光反應的抑制作用,測定對化學發光反應具有猝滅作用的有機化合物。其三是通過偶合反應間接測定無機或有機化合物。其四是將魯米諾的衍生物如異魯米諾 (ABEI) 標記到羧酸和氨類化合物上,經過液相色譜 (HPLC) 或液相色譜 (LC) 分離后,再在堿性條件下與過氧化氫-鐵氰化鉀反應進行化學發光檢測。也可以采用其它分離方法,如將新合成的化學發光試劑異硫氰酸異魯米諾標記到酵母 RNA 后,通過離心和透析分離,然后進行化學發光檢測。此外應用的還有 N 2(B2 羧基丙酰基 ) 異魯米諾,并對其性能進行了研究。
化學發光試劑是某種物質分子吸收化學能而產生的光輻射。任何一個化學發光反應都包括兩個關鍵步驟,即化學激發和發光。因此,一個化學反應要成為發光反應,必須滿足兩個條件:*:反應必須提供足夠的能量( 170 ~ 300KJ / mol ) ,第二,這些化學能必須能被某種物質分子吸收而產生電子激發態,并且有足夠的熒光量子產率。到目前為止,所研究的化學發光反應大多為氧化還原反應,且多為液相化學發光反應。
化學發光試劑的發光效率是指發光劑在反應中的發光分于數與參加反應的分子數之比。對于一般化學發光反應,值約為 10 - 6 ,較典型的發光劑,如魯米諾,發光效率可達 0 . 01 ,發光效率大于 0 。 01 的發光反應極少見。現將幾種發光效率較高的常用的發光劑及其發光機理歸納如下。魯米諾的衍生物主要有異魯米諾、 4— 氨基已基 —N 一乙基異魯諾及 AHEI 和 ABEI 等。魯米諾在堿性條件下可被一些氧化劑氧化,發生化學發光反應,輻射出zui大發射波長為 425nm 的化學發光試劑.知識是一種力量,也是一種發展.